Проведение иммунологических исследований: показания, нормы и отклонения

Иммуноферментный анализ

Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

Напоминаем вам, что самостоятельная интерпретация результатов недопустима, и приводимая ниже информация носит исключительно справочный характер.

Иммуноферментный анализ: показания к назначению, правила подготовки к сдаче анализа, расшифровка результатов.

Иммуноферментный анализ (ИФА, англ. Enzyme immunoassay, EIA) –лабораторный метод определения различных соединений (макромолекул, вирусов и пр.), в основе которого лежит реакция антиген-антитело.

Генетически чужеродные вещества, попадая в организм человека, вызывают специфические процессы, направленные на удаление этих веществ. Система организма, выполняющая данную функцию, называется иммунной системой, а сами процессы – иммунологическими.

Иммунная система представляет собой совокупность лимфоидных органов, которые функционируют согласованно за счет миграции лимфоцитов из крови в ткани и из ткани в кровь, медиаторов (посредников) и других факторов.

Лимфоциты.jpg

В- и Т-лимфоциты

Иммунная система слагается из центральных и периферических органов. К центральным относят тимус и костный мозг. В них лимфоциты дифференцируются (созревают) до стадии функционально активной клетки. К периферическим органам иммунной системы принадлежат лимфатические узлы, селезенка, лимфоидные структуры пищеварительного тракта, аппендикс, миндалины. В этих органах лимфоциты контактируют с антигеном, взаимодействуют между собой и с другими элементами иммунной системы.

Практически все периферические органы иммунной системы являются фильтрами или барьерами для распознавания, захвата и расщепления антигена.

Иммунная система.jpg

Антиген (англ. antigen от antibody-generator — «производитель антител») – любое вещество, несущее признаки генетически чужеродной информации, которое организм рассматривает как чужеродное или потенциально опасное и против которого начинает вырабатывать антитела (иммунный ответ).

Способность антигенов вызывать иммунный ответ называется иммуногенностью, а способность образовывать комплексы с антителами – антигенностью.

К антигенам относятся белки, полисахариды, нуклеиновые кислоты, в том числе и в составе компонентов различных биологических структур (клеток, тканей, вирусов и т.д.).

Антитела (англ. antibody) – это специальные белки иммуноглобулины (Ig), которые вырабатывает иммунная система в ответ на попадание любого чужеродного агента в организм для борьбы с ним.

Антитела обладают способностью образовывать прочные комплексы с антигенами для последующего удаления их из организма.

Иммуноглобулины (Ig) по своей химической структуре относятся к гликопротеидам (белкам, содержащим в своей структуре олигосахариды). По своим свойствам и структурным особенностям иммуноглобулины подразделяются на пять основных классов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM.

Виды антител.jpg

В организме антитела вырабатываются клетками крови – В-лимфоцитами. На своей поверхности эти клетки имеют рецепторы, с помощью которых они могут узнавать чужеродный антиген.

Антиген, встречаясь в кровотоке с соответствующим ему рецептором В-лимфоцита, активирует его. В-лимфоцит многократно делится и образует клон плазматических клеток. Каждый клон клеток секретирует однородные по своей структуре антитела.

Бактерия.jpg

Показания к проведению иммунологического обследования:

Острые и хронические бактериальные, вирусные и паразитарные инфекции (болезнь Боткина, сепсис, пневмония, лейшманиоз, туберкулез, лепра и др.), подозрение на СПИД.

Аутоиммунные заболевания (ревматическая болезнь, ревматоидный артрит, системная красная волчанка и др.).

Аллергические заболевания (бронхиальная астма, поллиноз и др.).

Злокачественные заболевания (лейкозы, лимфогрануломатоз и др.).

Кожно-венерические заболевания (контактный дерматит, пузырчатка, микоз, сифилис и др.).

Контроль цитостатической, иммунодепрессивной и иммуностимулирующей терапии.

Обследование пациентов до и после трансплантации.

Первичные иммунодефицитные состояния и др.

Постановка иммунологического диагноза складывается из следующих этапов:

  1. Сбор иммунологического анамнеза.
  2. Выявление клинических проявлений иммунопатологии.
  3. Иммунологические методы исследования.

В иммуноферментном анализе применяют ферменты, которые могут связывать антитела или антигены, меняют окраску специального хромогенного субстрата при взаимодействии с ним и могут быть зарегистрированы физико-химическим методом (методом спектрофотометрии, флуориметрическим, люминисцентным и др.).

На настоящий момент имеются усилительные системы, позволяющие регистрировать наличие всего нескольких сотен молекул ферментов в 1 мл раствора.

READ
Травма спинного мозга: первая помощь, восстановление и последствия

Фермент – это сложное органическое вещество, вырабатываемое живой клеткой, способствующее различным химическим реакциям, происходящим в организме.

Хромогенный субстрат – это вещество белковой природы, приобретающее определенную окраску после расщепления специфическим протеолитическим ферментом.

Фотометрический анализ – метод качественного и количественного анализа, основанный на избирательном поглощении инфракрасного, видимого или ультрафиолетового излучения молекулами определяемого компонента или его соединения с соответствующим реагентом.

При проведении иммуноферментного анализа в качестве твердой фазы используется поверхность лунок полистиролового планшета, на которую адсорбированы входящие в состав тест-системы известные антитела (против определяемого антигена).

В лунку вносят исследуемую сыворотку крови. При наличии искомого антигена он соединяется с антителом, и образуются комплексы. Лунки промывают и удаляют не связавшиеся компоненты. В лунки вносят антитела к искомому антигену, меченые ферментом. Меченые антитела присоединяются к предыдущему комплексу и также остаются на стенках. Затем в лунки добавляют специфичный для фермента субстрат (перекись водорода) и хромоген (ортофенилендиамин). Если в исследуемой жидкости был антиген, фермент взаимодействует с перекисью водорода и разлагает его. Выделившийся при этом кислород окрашивает хромоген в желтый цвет. По интенсивности окрашивания, возникающего в результате реакции фермента и субстрата, можно судить о количестве антигенов.

По аналогичной схеме работают тест-системы для определения антител, но в качестве иммуносорбента в них используются антиген, а раствор, который добавляют, содержит раствор антигенов, меченых ферментом.

В клинической диагностике с помощью фиксированных на твердой фазе антител (антигенов), определяют присутствие антигенов микроорганизмов, антител к ДНК, иммунных комплексов, антигенов раковых клеток, антител к различным видам бактерий, вирусов, простейших.

Метод ИФА может применяться для диагностики:

  1. Вирусных заболеваний:
    • ВИЧ-инфекции;
    • вирусных гепатитов;
    • цитомегаловирусной инфекции;
    • вируса Эпштейн-Барр;
    • герпетической инфекции;
    • коронавирусной болезни.
    1. Для диагностики инфекций, передающихся половым путем:
      • сифилиса;
      • хламидиоза;
      • трихомониаза;
      • гонореи;
      • уреаплазмоза.
      1. Уровня гормонов в эндокринологии.
      2. Аутоантител и маркеров онкологических заболеваний в онкологии.
      3. Общего IgE и специфических IgE антител в аллергологии.
      4. Лекарственных препаратов, наркотиков в биологических образцах.
      5. Белков сыворотки крови (ферритина, фибронектина и др.).

      Подготовка к процедуре

      Взятие пробы для лабораторного исследования методом ИФА должно проводиться:

      • желательно с 7 до 9 часов утра;
      • натощак, т.е. через 8-12 часов после последнего приема пищи;
      • после воздержания от алкоголя не менее 24 часов;
      • до проведения диагностических и лечебных процедур;
      • в ряде случаев следует учитывать фазу менструального цикла, фармакодинамику лекарственных препаратов, циркадные ритмы.

      Пациент должен находиться в спокойном состоянии не менее 15 минут: сидя или лежа. Наложение жгута (манжеты) не должно превышать 1 мин.

      Преимущества иммуноферментного анализа по сравнению с другими методами определения антигенов и антител:

      • высокая чувствительность (ИФА может обнаруживать одиночные молекулы анализируемого вещества);
      • возможность использования минимальных объемов исследуемого материала;
      • стабильность всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА при хранении;
      • простота проведения реакции;
      • возможность автоматизации всех этапов реакции;
      • относительно низкая стоимость диагностических наборов.
      • при наличии ревматоидного фактора в крови, который является антителом против собственных IgG;
      • при различных системных заболеваниях;
      • при нарушениях обменных процессов в организме;
      • при приеме некоторых лекарственных препаратов;
      • у новорожденных детей.
      1. Л. К. Решетникова. Иммунология. – Благовещенск, 2019. – 176 с.
      2. Гусякова О.А. Иммуноферментный анализ: учебное пособие для студентов лечебного, педиатрического, медико-профилактического факультетов, Самара: типография Клиник ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава», 2010. – 32 с.
      ВАЖНО!

      Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.

      Иммунный статус. Общая информация

      Иммунный статус (ИС) – совокупность количественных и функциональных показателей, отражающих состояние иммунной системы человека в данный момент времени. Это понятие введено для объективной оценки состояния иммунной системы человека. Изучение показателей иммунитета при иммунных нарушениях должно включать исследования количества и функциональной активности основных компонентов иммунной системы. Все нарушения функции иммунной системы классифицируют, исходя из проявлений различных заболеваний. Выделяют первичные и вторичные иммунодефициты, аутоиммунные, аллергические и лимфопролиферативные заболевания.

      Для оценки функционирования всех компонентов иммунной системы, Т и В системы иммунитета, фагоцитарной и системы комплемента, должны быть включены количественные и функциональные методы. Для оценки гуморального звена иммунитета выполняют следующие исследования: определение продукции иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови; определение относительного и абсолютного содержания В-лимфоцитов и их субпопуляций, компонентов комплемента и циркулирующих иммунных комплексов, функциональные тесты (реакция бласттрансформации с митогенами), определение специфических антител, кожные пробы.

      Для оценки Т-клеточного звена проводят исследования с определением относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов и их субпопуляций (Т-хелперов, ЦТЛ), натуральных киллеров, их активационных маркеров, функциональные тесты (реакция бласт-трансформации с митогенами), определение продукции цитокинов.

      Состояния фагоцитарной системы оценивают по многим тестам: адгезивная способность нейтрофилов по прилипанию к волокнам нейлона; миграция, хемотаксис в реакции торможения миграции нейтрофилов; метаболическая активность и образование активных форм кислорода по восстановлению нитросинего тетразолия; фагоцитарная активность нейтрофилов в тестах спонтанного и стимулированного микробными полисахаридами фагоцитоза; иммунофенотипирование нейтрофилов.

      Ранее эти методы были разделены на тесты 1-го и 2-го уровня. Тесты 1-го уровня являются ориентировочными и направлены на выявление грубых дефектов в иммунной системе. Тесты 2-го уровня направлены на идентификацию конкретной “поломки” в иммунной системе.

      Тесты 1-го уровня

      • определение относительного и абсолютного количества лейкоцитов, нейтрофилов, моноцитов, лимфоцитов и тромбоцитов периферической крови;
      • определение функциональной активности нейтрофилов (НСТ тест);
      • тесты иммунофенотипирования для определения относительного и абсолютного количества Т- и В-лимфоцитов, натуральных киллеров;
      • определение концентрации иммуноглобулинов основных классов (IgA, IgM, IgG, IgE);
      • определение гемолитической активности комплемента.

      С помощью минимального набора тестов можно диагностировать первичные иммунодефициты: хроническую грануломатозную болезнь, Х-сцепленную агамма-глобулинемию, гипер–IgM–синдром, селективный дефицит IgA, синдром Вискотта-Олдрича, тяжелый комбинированный иммунодефицит.

      Тесты 2-го уровня

      • тесты иммунофенотипирования для определения относительного и абсолютного количества популяций и субпопуляций Т-, В-, NK-лимфоцитов;
      • активационные маркеры лимфоцитов;
      • оценка различных этапов фагоцитоза и рецепторного аппарата фагоцитарных клеток;
      • определение основных классов и подклассов иммуноглобулинов;
      • циркулирующие иммунные комплексы;
      • определение концентрации компонентов комплемента в сыворотке крови (С3, С4, С5, С1-ингибитор);
      • функциональная активность различных субпопуляций лимфоцитов;
      • оценка пролиферативной активности Т- и В-лимфоцитов;
      • исследование интерферонового статуса;
      • кожные пробы и т.д.

      Набор полученных показателей при иммунологическом обследовании называется иммунограммой.

      Следует особо подчеркнуть, что полноценный анализ иммунограммы возможен только в комплексе с клиническим состоянием и анамнезом пациента. Отсутствие характерных сдвигов в иммунограмме при выраженных клинических симптомах следует считать атипичной реакцией иммунной системы, что является отягощающим признаком заболевания. Полученные данные пациента сравниваются со средними значениями для данного аналита, полученными в регионе проживания пациента. Среднестатистические показатели различаются в зависимости от региона и подчиняются климатогеографическим условиям, экологической обстановке, условиям жизни. Необходимо также учитывать возраст пациента и циркадные ритмы.

      Исследование показателей ИС имеет большое значение для диагностики и дифференциальной диагностики, особенно при первичных иммунодефицитах и лимфопролиферативных заболеваниях, для оценки тяжести, активности, длительности течения и прогноза различный заболеваний, оценки эффективности проводимого лечения.

      Иммунологические методы исследования в лабораторной практике

      Серологические реакции различаются по способности выявлять отдельные классы антител. Реакция агглютинации, например, хорошо выявляет lgM-антитела, но менее чувствительна для определения lgG-антител. Реакции связывания комплемента и гемолиза, которые требуют участия комплемента, не выявляют антитела, не присоединяющие комплемент, например lgA-антитела и lgE-антитела. В реакции нейтрализации вирусов участвуют лишь антитела, направленные против антигенных детерминант поверхности вириона, связанных с патогенностью. Чувствительность иммунулогических методов превосходит все другие методы исследования антигенов и антител, в частности радиоиммунный и иммуноферментный анализы позволяют улавливать присутствие белка в количествах, измеряемых в нанограммах и даже в пикограммах.

      С помощью предложенного способа определяют группу и проверяют безопасность крови (гепатит В и ВИЧ-инфекция). При трансплантации тканей и органов, иммунологический метод позволяет определять совместимость тканей и тестировать методы подавления несовместимости. В судебной медицине используют реакцию Кастеллани для определения видовой специфичности белка и реакцию агглютинации для определения группы крови.

      Иммунологические методы широко применяют в лабораторной диагностике инфекционных болезней. Этиологию заболевания устанавливают также на основании прироста антител к возбудителю в сыворотке крови реконвалесцента по сравнению с пробой, взятой в первые дни болезни. На основе исследования изучают иммунитет населения по отношению к массовым инфекциям, например к гриппу, а также оценивают эффективность профилактических прививок.

      Развитию иммунологических методов способствовало создание моноклональных антител, продуцируемых гибридомой, полученной в результате слияния иммунокомпетентной клетки В-лимфоцита и клетки миеломы мышей. Моноклональные антитела несут только одну химически однородную популяцию антител, комплементарную специфической детерминанте антигена, что позволяет осуществлять тонкую дифференциацию белков. Развитие иммунологического метода исследования идет как по линии совершенствования реагентов (чистоты антигенов и антител), так и по линии создания автоматизированных систем постановки реакций и их инструментального учета.

      Виды реакций метода иммунологического исследования.

      В зависимости от их механизма и учета результатов, иммунологический метод исследования можно подразделить на 5 видов реакции.

      1.Реакции, основанные на феномене агглютинации.

      Агглютинация представляет собой склеивание клеток или отдельных частичек — носителей антигена с помощью иммунной сыворотки к этому антигену.

      Реакция агглютинации бактерий с использованием соответствующей антибактериальной сыворотки относится к наиболее простым серологическим реакциям. Взвесь бактерий добавляют к различным разведениям испытуемой сыворотки крови и через определенное время контакта при t 37° регистрируют, при каком наивысшем разведении сыворотки крови происходит агглютинация. Реакцию агглютинации бактерий используют для диагностики многих инфекционных болезней: бруцеллеза, туляремии, брюшного тифа и паратифов, бациллярной дизентерии, сыпного тифа.

      Реакции агглютинации для определения группы крови и резус-фактора основаны на взаимодействии аллоантител (изоантител) и антигенов эритроцитов. Антитела против резус-фактора являются неполными, они не способны к прямой реакции с резус-положительными эритроцитами, поэтому для их обнаружения используют реакцию Кумбса, основанную на выявлении неполных антител с помощью антиглобулиновых сывороток. К эритроцитам известной специфичности добавляют исследуемую сыворотку крови, а вслед за этим антиглобулиновую сыворотку против lgG (непрямая реакция Кумбса). Fab-фрагменты неполных антител исследуемой сыворотки крови присоединяются к эритроцитам, а к свободным Fc-фрагментам этих антител присоединяются антитела против lgG, и происходит агглютинация эритроцитов.

      Реакция пассивной или непрямой гемагглютинации (РПГА, РНГА). В ней используют эритроциты или нейтральные синтетические материалы (например, частицы латекса), на поверхности которых сорбированы антигены (бактериальные, вирусные, тканевые) или антитела. Их агглютинация происходит при добавлении соответствующих сывороток или антигенов. Эритроциты, сенсибилизированные антигенами, называют антигенным эритроцитарным диагностикумом и используют для выявления и титрования антител. Эритроциты, сенсибилизированные антителами, называют иммуноглобулиновыми эритроцитарными диагностикумами и применяют для выявления антигенов.

      Реакцию пассивной гемагглютинации используют для диагностики заболеваний, вызванных бактериями (брюшной тиф и паратифы, дизентерия, бруцеллез, чума, холера и др.), простейшими (малярия) и вирусами (грипп, аденовирусные инфекции, вирусный гепатит В, корь, клещевой энцефалит, крымская геморрагическая лихорадка и др.), а также для определения некоторых гормонов, выявления повышенной чувствительности больного к лекарственным препаратам и гормонам, например пенициллину и инсулину.

      Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на феномене предотвращения (торможения) иммунной сыворотки гемагглютинации эритроцитов вирусами, используется для выявления и титрования противовирусных антител. Она служит основным методом серодиагностики гриппа, кори, краснухи, эпидемического паротита, клещевого энцефалита и других вирусных инфекций, возбудители которых обладают гемагглютинирующими свойствами, например, для серодиагностики клещевого энцефалита, в лунки панели разливают двукратные разведения сыворотки больного на щелочном боратном буферном растворе. Затем добавляют определенное количество, обычно 8 АЕ (агглютинирующих единиц), антигена клещевого энцефалита и после 18 ч экспозиции при t 4° вносят взвесь гусиных эритроцитов, приготовленную на кислом фосфатно-буферном растворе. Если в сыворотке крови больного есть антитела к вирусу клещевого энцефалита, то антиген нейтрализуется и агглютинация эритроцитов не происходит.

      2.Реакции, основанные на феномене преципитации.

      Преципитация происходит в результате взаимодействия антител с растворимыми антигенами. Простейшим примером реакции преципитации является образование в пробирке непрозрачной полосы преципитации на границе наслоения антигена на антитело. Широко применяют различные разновидности реакции преципитации в полужидких гелях агара или агарозы (метод двойной иммунодиффузии по Оухтерлоню, метод радиальной иммунодиффузии, иммуноэлетрофорез), которые носят одновременно качественный и количественный характер. В результате свободной диффузии, в геле антигенов и антител в зоне оптимального их соотношения образуются специфические комплексы — полосы преципитации, которые выявляют визуально или при окрашивании. Особенностью метода является то, что каждая пара антиген-антитело формирует индивидуальную полосу преципитации, и реакция не зависит от наличия в исследуемой системе других антигенов и антител.

      Для постановки двойной иммунодиффузии наливают слой растопленного геля на стеклянную пластинку и после затвердевания вырезают лунки диаметром 1,5–3 мм. В расположенные по кругу лунки помещают исследуемые антигены, а в центральную лунку — иммунную сыворотку известной специфичности. Диффундируя навстречу друг другу, гомологичные сыворотки и антигены образуют преципитат.

      При радиальной иммунодиффузии (по методу Манчини), иммунную сыворотку вносят в агар. Антиген, помещенный в лунки, диффундирует через агар, и в результате преципитации с иммунной сывороткой, вокруг лунок образуются непрозрачные кольца, внешний диаметр которых пропорционален концентрации антигена. Метод используют для определения классов иммуноглобулинов, а модификации метода можно применять для определения противомикробных антител, относящихся к различным классам иммуноглобулинов.

      Иммуноэлектрофорез основан на усилении миграции в геле антигенов и антител путем помещения пластины геля с реагентами в электрическое поле. При этом достигается разделение антигенов и антител на компоненты в соответствии с их подвижностью и зарядом.

      Разновидностью иммуноэлектрофореза является радиоиммунофорез. В этом случае после электрофоретического разделения антигенов в канавку, вырезанную параллельно движению антигенов в геле, наливают сначала меченную радиоактивным йодом иммунную сыворотку против определяемых антигенов, а затем иммунную сыворотку против lgG-антител, которая преципитирует образовавшиеся комплексы антитела с антигеном. Все несвязавшиеся реагенты вымывают, а комплекс антиген-антитело обнаруживает методом авторадиографии.

      3.Реакции с участием комплемента.

      В качестве комплемента используют свежую сыворотку крови морской свинки, основанную на способности субкомпонента комплемента Clq и затем других компонентов комплемента присоединяться к иммунным комплексам.

      Реакция связывания комплемента (РСК) позволяет титровать антигены или антитела по степени фиксации комплемента комплексом антиген-антитело. Эта реакция состоит из двух фаз: взаимодействия антигена с испытуемой сывороткой крови (исследуемая система) и взаимодействия гемолитической сыворотки с эритроцитами барана (индикаторная система). При положительной реакции в исследуемой системе происходит связывание комплемента, и тогда при добавлении сенсибилизированных антителами эритроцитов, гемолиза не наблюдается. Реакцию применяют для серодиагностики сифилиса (реакция Вассермана), вирусных и бактериальных инфекций.

      Реакция радиального гемолиза эритроцитов может протекать в геле. Взвесь эритроцитов барана помещают в агарозный гель с комплементом; в застывшем на стекле слое делают лунки и вносят в них гемолитическую сыворотку. Вокруг лунок в результате радиальной диффузии антител образуется зона гемолиза, радиус которой прямо пропорционален титру сыворотки. Если сорбировать на эритроцитах какой-либо антиген, например гликопротеиновый гемагглютинин вируса гриппа, краснухи или клещевого энцефалита, то можно воспроизвести феномен гемолиза иммунными сыворотками к этим вирусам. Реакцию радиального гемолиза в геле применяют в диагностике вирусных инфекций. Она характеризуется простотой постановки, нечувствительностью к сывороточным ингибиторам, позволяет титровать сыворотки крови по диаметру зоны гемолиза, не прибегая к серийным разведениям.

      Иммунное прилипание. Эритроциты, тромбоциты и другие клетки крови имеют на поверхности рецепторы к третьему компоненту комплемента (СЗ). Если к антигену (бактериям, вирусам и др.) добавить соответствующую иммунную сыворотку и комплемент, то образуется комплекс антиген-антитело, покрытый СЗ-компонентом комплемента. Эту реакцию применяют при изучении ряда вирусных инфекций (клещевого энцефалита, денге), которые сопровождаются иммунопатологическими процессами и циркуляцией в крови вирусных антигенов в комплексе с антителами.

      4.Реакция нейтрализации.

      Основана на способности антител нейтрализовать некоторые специфические функции макромолекулярных или растворимых антигенов, например активность ферментов, токсины бактерий, болезнетворность вирусов. В бактериологии эту реакцию используют для обнаружения антистрептолизинов, антистрептокиназы и антистафилолизинов. Реакцию нейтрализации токсинов можно оценивать по биологическому эффекту, так, например, титруют антистолбнячные и антиботулинические сыворотки. Смесь токсина с антисывороткой, введенная животным, не вызывает их гибели. Различные варианты реакции нейтрализации применяют в вирусологии. При смешивании вирусов с соответствующей антисывороткой и введении этой смеси животным или в клеточные культуры, патогенность вирусов нейтрализуется и при этом животные не заболевают, а клетки культур не подвергаются деструкции.

      5.Реакции с использованием химических и физических меток (ИФА).

      Иммунофлюоресценция заключается в использовании меченых флюорохромом антител, точнее, иммуноглобулиновой фракции антител lgG. Меченое флюорохромом антитело образует с антигеном комплекс антиген-антитело, который становится доступным наблюдению под микроскопом в УФ-лучах, возбуждающих свечение флюорохрома. Реакцию прямой иммунофлюоресценции используют для изучения клеточных антигенов, выявления вируса в зараженных клетках и обнаружения бактерий и риккетсий в мазках. Так, для диагностики бешенства, отпечатки кусочков мозга животных, подозреваемых на вирусоносительство, обрабатывают люминесцирующей антирабической сывороткой. При положительном результате, в цитоплазме нервных клеток выявляются глыбки ярко-зеленого цвета. На обнаружении антигенов вирусов в клетках отпечатков со слизистой оболочки носа основана экспресс-диагностика гриппа, парагриппа и аденовирусной инфекции.

      Более широко применяют метод непрямой иммунофлюоресценции, основанный на выявлении комплекса антиген-антитело с помощью люминесцирующей иммунной сыворотки против lgG-антител и используемой для обнаружения не только антигенов, но и титрования антител. Метод нашел применение в серодиагностике герпеса, цитомегалии, лихорадки Ласса. Препараты с наслоенной исследуемой сывороткой крови помещают в термостат при t 37° для образования иммунных комплексов, а затем, после отмывания несвязавшихся реагентов, выявляют эти комплексы меченой люминесцирующей сывороткой против глобулинов человека. Применяя меченые иммунные сыворотки против lgM- или lgG-антител, можно дифференцировать тип антител и обнаруживать ранний иммунный ответ по наличию lgM-антител.

      Иммунофлюоресценцию широко используют не только в бактериологии, вирусологии, паразитологии, но и в иммунопатологии для обнаружения антител к тканевым антигенам человека.

      Иммуноферментные или энзим-иммунологические методы основаны на использовании антител, конъюгированных с ферментами, главным образом пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой. Чтобы обнаружить соединение меченых антител с антигеном, добавляют субстрат, разлагаемый присоединенным к lgG ферментом, с окрашиванием в желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый (фосфатаза) цвет. Используют также ферменты, разлагающие не только хромогенный, но и люмогенный субстрат. В этом случае при положительной реакции появляется свечение. Подобно иммунофлюоресценции, иммуноферментный метод применяют для обнаружения антигенов в клетках или титрования антител на антигенсодержащих клетках.

      Наиболее популярной разновидностью иммуноферментного метода является иммуносорбция. На твердом носителе, которым могут быть целлюлоза, полиакриламид, декстран и различные пластмассы, сорбируют антиген. Чаще носителем служит поверхность лунок микропанелей. В лунки с сорбированным антигеном вносят исследуемую сыворотку крови, затем меченую ферментом антисыворотку и субстрат. Положительные результаты учитывают по изменению цвета жидкой среды. Для обнаружения антигенов, на носитель сорбируют антитела, затем вносят в лунки исследуемый материал и проявляют реакцию меченой ферментом антимикробной сывороткой. Повышению чувствительности иммунофлюоресцентного и иммуноферментного методов способствует введение в систему реакции авидина и биотина.

      Радиоиммунологический метод основан на применении радиоизотопной метки антигенов или антител. Является наиболее чувствительным методом определения антигенов и антител, используется для определения гормонов, лекарственных веществ и антибиотиков, для диагностики бактериальных, вирусных, риккетсиозных, протозойных заболеваний, исследования белков крови, тканевых антигенов. Первоначально он был разработан как специфический метод измерения уровня циркулирующих в крови гормонов. Тест-системой являлись меченый радионуклидом гормон (антиген) и антисыворотка к нему. Если к такой антисыворотке добавить материал, содержащий искомый гормон, то он свяжет часть антител, при последующем внесении меченого титрованного гормона с антителами свяжется уменьшенное по сравнению с контролем его количество. Результат оценивают по сопоставлению кривых связанной и несвязанной радиоактивной метки. Эта разновидность метода носит название конкурентной реакции. Существуют и другие модификации радиоиммунологического метода.

      Иммуногистологические методы предназначены для определения антигенов на поверхности или внутри клетки, например для обнаружения маркеров лимфоцитов и иммунокомплексов при гломерулонефритах и других заболеваниях почек. В этой реакции для выявления антигенов пользуются или иммунофлюоресценцией, или иммуноферментными конъюгатами с пероксидазой. Количество специфических антигенов определяют по интенсивности окрашивания. Иногда используют автоматическую регистрацию с помощью спектрофотометра.

      Проведение иммунологических исследований: показания, нормы и отклонения

      Это исследование включает в себя комплексную оценку субпопуляционного состава лимфоцитов, уровня циркулирующих иммунных комплексов, основных классов иммуноглобулинов и С3-, С4-компонентов комплемента периферической крови. Такой набор тестов позволяет уточнить степень поражения иммунной системы, подобрать препарат для адекватной иммунокорригирующей терапии, оценить эффективность проводимого лечения, дать прогноз течения заболевания.

      * Результаты исследования выдаются с заключением врача – аллерголога-иммунолога, доктора медицинских наук.

      Набор тестов:

      Синонимы русские

      Иммунограмма, иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии.

      Синонимы английские

      Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.

      Метод исследования

      Какой биоматериал можно использовать для исследования?

      Как подготовиться к исследованию?

      • Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
      • Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
      • Полностью исключить прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием (по согласованию с врачом).
      • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
      • Не курить в течение 30 минут до исследования.

      Общая информация об исследовании

      В современном понимании иммунный статус человека – это совокупность лабораторных показателей, характеризующих ко­личественную и функциональную активность клеток иммунной системы в данный момент времени. Оценка иммунного статуса проводится с помощью иммунологического лабораторного обследования – иммунограммы. Иммунограмма крови не отража­ет избирательно состояние патологически измененного органа или системы, но позволяет оценить иммунную систему в целом (сум­марный эффект изменения активности иммунной системы в ответ на чужеродный антиген).

      Определение клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлюориметрии.

      Иммунофенотипирование – это характеристика клеток, полученная при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

      Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD-антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития.

      CD-антигены (англ. cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно меченные моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии рассчитать содержание лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

      В основе проточной цитофлюориметрии лежит фотометрическое и флюоресцентное измерение отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

      Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов –

      но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

      • Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток (Т-NK-клетки) (CD3 + CD56 + CD45 + ),
      • NK-клетки, экспрессирующие альфа-цепь антигена CD8 (CD3 – СD8 + CD45 + ),
      • активированные В-лимфоциты (CD3 – CD25 + CD45 + ),
      • активированные Т-лимфоциты (CD3 + HLA-DR + CD45 + ) и активированные цитотоксические лимфоциты (CD8 + HLA-DR + CD45 + ),
      • В-лимфоциты и активированные NK-клетки (CD3 – HLA-DR + CD45 + ),
      • активированные Т-лимфоциты, экспрессирующие альфа-цепь рецептора ИЛ-2 (CD3 + CD25 + CD45 + ),
      • регуляторные Т-хелперные клетки (CD4 + CD25 bright CD127 neg CD45 + ), выполняющие иммуносупрессорную функцию.

      Такое всестороннее изучение клеточного состава лимфоцитов в совокупности с результатами других тестов, входящих в состав исследования, позволяет установить более тонкие механизмы иммунологических нарушений, уточнить степень и глубину поражения иммунной системы и подобрать препарат для последующей адек­ватной иммунокорректирующей терапии, оценить эффективность проводимого лечения, дать прогноз заболевания.

      Когда назначается исследование?

      Исследование рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдромам.

      С инфекционным синдромом:

      • частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
      • бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
      • урогенитальные инфекции;
      • грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
      • рецидивирующий герпес различной локализации;
      • гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
      • длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
      • генерализованные инфекции (сепсис, гнойные менингиты).

      С аллергическим (атопическим) синдромом:

        ;
      • нейродермит;
      • экзема с инфекционным компонентом;
      • тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.

      С аутоиммунным синдромом:

      • ревматоидный артрит;
      • рассеянный склероз;
      • диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
      • аутоиммунный тиреоидит;
      • неспецифический язвенный колит.

      С иммунопролиферативным синдромом:

      • опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

      Что означают результаты?

      Уровень различных клеточных популяций лимфоцитов может повышаться или понижаться при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

      Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

      Субпопуляция лимфоцитов

      Повышение показателя

      Снижение показателя

      T-лимфоциты (CD3 + CD19 – )

      – Острые и хронические инфекции

      – Длительный прием лекарственных препаратов (особенно монотерапия)

      – Прием биологически активных добавок

      – Интенсивные занятия спортом

      – Некоторые виды инфекций

      – Прием иммуносупрессивных препаратов

      T-хелперы (CD3 + CD4 + CD45 + )

      – Ряд аутоиммунных заболеваний

      – Отдельные T-клеточные инфекции

      – Отравление солями бериллия

      – Иммунодефицитные состояния (основной лабораторный признак вторичного иммунодефицита)

      – Алкогольная болезнь печени

      – Прием иммуносупрессивных препаратов или прием стероидов

      T-цитотоксические лимфоциты (CD3 + CD8 + CD45 + )

      – Некоторые вирусные инфекции

      – Ряд T-клеточных лимфозов

      – Ряд аутоиммунных патологий

      – Некоторые виды аутоиммунных, аллергических заболеваний

      Активированные T-лимфоциты (CD3 + HLA-DR + CD45 + )

      – Алкогольный цирроз печени

      Не имеет диагностического значения

      B-лимфоциты (CD19 + CD3 – )

      – Ряд аутоиммунных патологий

      – Длительное воздействие формальдегида

      Натуральные “киллеры” (CD3 – CD56 + CD45 + ), (CD3 – CD16 + CD45 + )

      – Фаза восстановления после вирусных инфекций (гепатит B, C)

      – Ряд аутоиммунных заболеваний

      – Алкогольный цирроз печени

      – Ряд аутоиммунных заболеваний

      – Иммуносупрессивная терапия и терапия стероидами

      T-натуральные “киллеры”, НК-Т (CD3 + CD56 + CD45 + )

      – Длительные хронические воспалительные процессы

      – Тяжелое течение воспалительных процессов

      – Длительная персистенция антигена в организме

      Не имеет диагностического значения

      B-1-клетки (CD19 + CD5 + CD27 – CD45 + )

      – Аутоиммунная патология (системная красная волчанка, ревматоидный артрит, аутоиммунный тиреоидит, неспецифический язвенный колит, миастения)

      – Аутоиммунные поражения при инфекционных заболеваниях (хламидиоз, синдром Рейтера, бруцеллез)

      Не имеет диагностического значения

      T-reg. (регуляторные T-клетки (CD4 + CD25 bright CD127 neg CD45 + )

      – Аутоиммунная патология (сахарный диабет 1-го типа, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, аутоиммунный тиреоидит, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, миастения)

      К каждой иммунограмме прилагается письменное заключение врача-иммунолога.

      Важные замечания

      Для диагностики патологий результаты этого исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов. Также следует отметить, что клиническую значимость исследования существенно повышает оценка иммунологического статуса пациента в динамике.

      Проведение иммунологических исследований: показания, нормы и отклонения

      Марина Дмитриевна

      Иммунологические исследования позволяют оценить уровень защитных функций организма. Такие методы диагностики назначают пациентам, у которых подозревают аутоиммунное, инфекционное или паразитарное заболевание. Анализы иммунологического характера дают возможность выявить гормональные нарушения, точно определить группу и резус-фактор крови, распознать аллергические и аутоиммунные процессы, установить тканевые и опухолевые антигены.

      Что такое иммунитет?

      Иммунная система отвечает за защитные функции организма. Оберегает человека от воздействия чужеродных микроорганизмов и веществ, попавших извне. Уничтожает нефункциональные и старые клетки организма. Стойкий иммунитет обеспечивает противостояние вирусам, бактериям, паразитам и прочим инфекциям. Но если работа системы нарушена, организм человека подвержен заболеваниям. Иммунологическое исследование крови дает возможность оценить состояние пациента и выявить нарушения.

      Проведение иммунологических исследований

      В настоящее время медики фиксируют снижение общего иммунитета у населения, что связанно со многими факторами: плохая экологическая обстановка, социально-экономическая сфера тяжелая, что влечет постоянные стрессы. На фоне этих явлений развивается вторичное иммунодефицитное состояние.

      Иммунитет слаб после приема медикаментов, или вирусное заболевание перешло в хроническую форму. Болезнь время от времени рецидивирует и оказывает угнетающее действие на не вполне здоровую иммунную систему. Иммунологические методы исследования назначаются лечащим врачом для определения состояния защитной системы организма.

      Показания к проведению исследования

      Анализ крови на иммунитет проводят по назначению доктора. Показаниями к этому могут быть такие состояния:

      • наличие онкологических новообразований (снижают функции иммунной системы);
      • частые болезни вирусной и инфекционной этиологии;
      • аутоиммунные заболевания;
      • иммунные нарушения наследственного или приобретенного характера;
      • неоднократная аллергия различного происхождения;
      • хирургическое вмешательство (пересадка органов и другие сложные операции);
      • прием лекарств, которые влияют на изменения иммунитета.

      Иммунологические исследования врач назначит при наличии:

      • сахарного диабета I и II типа;
      • болезней желудочно-кишечного тракта;
      • кандидоза;
      • миокардита;
      • анорексии;
      • токсоплазмоза;
      • цитомегаловирусной инфекции;
      • ревматоидного артрита;
      • пиодермии;
      • бронхиальной астмы;
      • остеомиелита;
      • гломерулонефрита;
      • послеродовой депрессии и затяжных депрессивных состояний;
      • венерических заболеваний и т. д.

      Анализ на иммунитет для выявления аллоиммунных антител проводят в таких случаях:

      • бесплодие;
      • у новорожденного выявили гемолитическое заболевание;
      • перед проведением переливания крови;
      • во время беременности, если у женщины отрицательный резус-фактор;
      • при частых выкидышах, внематочных беременностях, замирании плода.

      Иммунологические методы исследования

      Патогенные микроорганизмы оказывают различное действие на организм, поэтому и иммунные ответы не одинаковы. Чтобы диагностика была правильной, нужно внимательно подбирать иммунологический тест.

      Исследования делятся на две группы:

      • Непрямые. Гистология, инструментальные и серологические анализы.
      • Прямые. Диагностические исследования ДНК, иммунофлюоресценция, микроскопия, бактериологические анализы.

      Иммунологический анализ – важный элемент в диагностике серьезных патологий, которые угрожают защитной системе организма. С помощью такого исследования разрабатывают эффективную схему лечения.

      Распространен иммунохимический анализ крови. Выявляет наличие антител посредством биохимических реакций. Для проведения исследований используют венозную кровь.

      Иммунология – один из разделов медицины, который изучает защитные свойства организма и реакцию иммунитета на инфекции. Поэтому расшифровкой исследований занимается специалист в этой области – иммунолог.

      Подготовка к сдаче анализа

      Прежде чем сдавать кровь на анализ, нужно подготовиться к процедуре:

      • Последний прием пищи — за 12 часов до сдачи анализа. В этот период отказаться от напитков, пить только воду без газа.
      • Употребление алкоголя даст неверный результат исследования. Чтобы этанол полностью вывелся из организма, нужно несколько дней, поэтому запрещено пить спиртное за 2-3 суток до процедуры.
      • Если пациент курящий, воздержаться за полчаса до сдачи анализа.
      • Не рекомендуется за день-два до процедуры есть слишком жирную, соленую или жареную пищу.
      • Женщинам не стоит сдавать анализы в критические дни.
      • Не рекомендуется проходить анализы после рентгенологического исследования, физеотерапевтического лечения и т.д.
      • За 30 минут до процедуры пациенту нужно успокоиться, стабилизировать эмоциональное и физическое состояние, так как стресс влияет на результат анализа.
      • При приеме медикаментов обязательно оповестить об этом специалиста, так как некоторые химические элементы, содержащиеся в препарате, оказывают влияние на результаты.

      Иммунологические анализы сдают в утренние часы.

      В таблице ниже указана расшифровка норм показателей у взрослых и детей при сдаче общего анализа крови.

      Нормы общего анализа крови у взрослых и детей

      Нормы показателей иммунологического анализа крови. Расшифровка

      Чтобы определится с расшифровкой анализов, необходимо знать нормальные показания иммуноглобулинов (вычисляются из расчета г/л):

      • Аллоиммунные антитела – 0.
      • Ig класса Е – 30-240.
      • Ig класа М – 0,5-3,5.
      • Ig класса G – 7-17.
      • Антитела класса А – 0,9-4,5.
      • Антинуклеарный фактор – 0.
      • АТ-ТПО – не более 5,6.
      • АТ-ТГ – меньше 1,1.
      • HLA – 0.

      Есть и другие показатели иммунологического теста:

      • MAR-тест – не более 50%.
      • ИФА – менее 60.
      • Антистрептолизин – 100-200 ед/мл.

      Если нормы имеют отклонения (повышенные или пониженные показатели), это свидетельствует о заболевании.

      Иммунологическая диагностика позволяет поставить правильный диагноз. Какие болезни можно заподозрить при повышенных показателях иммуноглобулинов?

      1. Данные ИФА выше нормы свидетельствуют о бесплодии.
      2. Повышенный показатель антител иммуноглобулина Е указывает на наличие паразитарного заболевания или аллергической патологии (астма, крапивница, сенная лихорадка, аллергический ринит и другие).
      3. Завышенные данные иммуноглобулина М свидетельствуют о заболеваниях печени, включая гепатиты, об острых формах инфекционных патологий, ревматоидном артрите и кандидозе.
      4. Повышенная норма АТ-ТПО говорит о болезнях щитовидной железы, аутоиммунных заболеваниях.
      5. Иммуноглобулин G при высоких показателях свидетельствует о наличии ВИЧ-инфекции, артрита, ревматического состояния, миеломы и т.д.
      6. Повышение нормы АТ-ТГ указывает на синдром Дауна, гипотериоз и прочие заболевания генетического характера.
      7. MAR-тест выше нормальных показаний говорит о мужском бесплодии.
      8. Высокий антинуклеарный фактор указывает на наличие одного из заболеваний: ревматоидный артрит, васкулит, гепатит, красная волчанка.
      9. Повышенный уровень иммуноглобулина А может быть реакцией на печеночную недостаточность, алкогольную интоксикацию, клубочковый нефрит, артрит и прочие заболевания.
      10. Если в крови содержится более 200 ед/мл антистрептолизина, то это свидетельствует о наличии одной из патологий: стрептококковой инфекции, ревматоидного поражения, острой формы гломерулонефрита.

      Расширенные иммунологические исследования выявляют серьезные нарушения в работе иммунной системы.

      Методы иммунологической диагностики

      Не только повышенный уровень иммуноглобулинов указывает на наличие проблемы. Например: при низком показателе Ig класса Е развиваются болезни, связанные с расширением сосудов и нарушениями моторики. А вот Ig А, М и G при пониженной норме свидетельствуют о циррозе печени и лучевой болезни. Норма может понизиться из-за отравления.

      В некоторых случаях показатели снижены из-за физического переутомления и стрессового состояния.

      У маленьких детей до 6 месяцев может наблюдаться понижение уровня иммуноглобулина на фоне физиологических особенностей. Также снижение показателей может быть вызвано приемом цитостатиков и иммунодеперссантов.

      Расшифровка анализа неверна, если женщина сдавала кровь на исследование во время менструального цикла. По этой причине не рекомендуется проходить процедуру в период критических дней.

      Читайте также: Иммуноглобулин Е – норма у детей и отклонения

      Преимущества иммунологической диагностики

      Скрининговыми иммунологическими исследованиями можно выявить, в какой цепи иммунитета возникли отклонения. Такой анализ определяет возможности человеческого организма в противостоянии с бактериальными и вирусными инфекциями. В процессе исследования определяются показатели иммунитета, антитела на раздражитель.

      Стоит отметить преимущества диагностики:

      • Высокая точность и достоверность.
      • Выполнить исследование можно за короткое время.
      • Выявить патологии можно на ранних этапах развития.
      • Проведение иммунологического исследования крови позволяет установить диагноз в затруднительной ситуации.

      Особую роль этот метод исследования играет в диагностике тяжелых заболеваний: онкологических патологий, отравлений, аллергических реакций, болезней аутоиммунного характера, нарушений репродуктивных функций.

      Иммунологический анализ крови

      Иммунологический анализ крови – это метод лабораторного исследования, позволяющий оценить состояние общего иммунитета, его напряженность – то есть насколько защитная система организма задействована в момент анализа, определить количество и функцию иммунных клеток крови, присутствие в ней антител. Иммунологический анализ способен выявить первичный и вторичный иммунодефициты, помочь при диагностике аутоиммунных, гематологических, инфекционных и лимфопролиферативных заболеваний.

      Когда назначается иммунологический анализ крови?

      Иммунологическое исследование проводится:

      Изображение 1: Иммунологический анализ крови - клиника Семейный доктор

      Иммунологический анализ крови

      • в случае повторяющихся инфекционных заболеваний;
      • в случае если инфекционное заболевание носит тяжёлый и затяжной характер;
      • при подозрениях на врожденный или приобретенный иммунодефицит;
      • при подозрении на аутоиммунное заболевание;
      • при аллергических реакциях;
      • перед серьёзными хирургическими вмешательствами;
      • в случае, если послеоперационный период протекает с осложнениями;
      • в целях контроля за ходом лечения некоторыми группами медикаментов (иммунодепрессантами, иммуномодуляторами и т.п.).

      Иммунологическое исследование крови в «Семейном докторе»

      Для исследования берётся кровь из локтевой вены. Сдать кровь на иммунологический анализ можно в любой из поликлиник «Семейного доктора».

      Интерпретация результатов производится врачом-иммунологом, который учитывает данные осмотра, жалобы пациента и результаты других исследований. Наибольшее внимание уделяется значительным отклонениям от нормы (более 20%), меньшие отклонения могут быть вызваны случайными факторами – диетой, стрессами, физическими нагрузками, а также индивидуальными особенностями организма.

      Показатели иммунологического анализа крови

      Иммунологический анализ включает в себя комплекс показателей, отражающих состав и функциональную активность основных клеток иммунной защиты в разбивке по видам клеток и продукты их деятельности (иммуноглобулины). Развернутый анализ иммунной системы является достаточно сложным, требующим много времени, поэтому в зависимости от цели исследования иммунологический анализ может быть ограничен показателями, представляющими конкретную функцию иммунитета или затрагиваемые конкретной патологией.

      Чаще всего исследуются:

      • субпопуляции лимфоцитов – белых кровяных телец, различные виды которых распознают чужеродные структуры (антигены), вырабатывают антитела, направленные против чужеродных агентов, регулируют интенсивность иммунных процессов, распознают и уничтожают изменённые клетки организма (например, раковые клетки);
      • иммуноглобулины – антитела, функцией которых является нейтрализация инфекционных возбудителей и токсинов. Прежде всего, исследуются иммуноглобулины классов A, M, G
        • Иммуноглобулины A (IgA) обеспечивают местный иммунитет слизистых оболочек. Повышенный уровень IgA отмечается при заболеваниях кожи, органов пищеварения и дыхания. Также это характерно при интоксикациях, алкоголизме, патологии печени и почек.
        • Иммуноглобулины M (IgM) активно вырабатываются при первичной защитной реакции организма, поэтому их повышенное количество наблюдаются в начале любого заболевания. Повышенное значение IgM также наблюдается при заболеваниях печени (прежде всего гепатите или циррозе печени).
        • Иммуноглобулины G (IgG) – самый массовый класс иммуноглобулинов. Они являются основной защитой, вырабатываемой в ответ на проникновение в организм инфекции. Их задача – убивать грибок, вирус, патогенные бактерии, обезвреживать вырабатываемые возбудителем инфекции токсины. Именно они отвечают за длительный иммунитет, защищающий нас от повторного поражения инфекцией.
        • Иммуноглобулины Е и D, вырабатываются, в основном, в ответ на паразитарную инфекцию (поражение глистами) или в случае атопической аллергии.

        Для определения чувствительности организма к тем или иным аллергенам проводится специальное исследование – аллергопанель, выявляющее специфические антитела к конкретной группе аллергенов (как правило это иммуноглобулины классов Е или G).

        Подготовка к иммунологическому анализу крови

        Для того чтобы результаты анализа были точными, сдавать кровь следует натощак. Лучше всего это сделать утром. Оптимально пациент должен не есть и не пить ничего, кроме воды в течение 12 часов перед сдачей анализа.

        Накануне анализа не следует принимать алкоголь. В течение часа перед сдачей анализа желательно не курить.

        Непосредственно перед сдачей анализа желательно присесть и находиться в покое 10-15 минут, чтобы исключить влияние физических и эмоциональных нагрузок на результаты исследований.

        Не занимайтесь самолечением. Обратитесь к нашим специалистам, которые правильно поставят диагноз и назначат лечение.

Ссылка на основную публикацию