Иммунофенотипирование лимфоцитов – проведение анализа и расшифровка

Условия для иммунофенотипирования лимфоцитов – для чего его проводят?

Одним из методов клинической диагностики является исследование крови способом иммунофенотипирования лимфоцитов. В его основе – реакция между антителами и антигенами, которая используется для определения типов клеток крови, взятых из образцов биологического материала – крови, лимфатических узлов или костного мозга.

Анализ проводится с использованием специальных маркеров или меток, которые присоединяются к антигенам клеток. С помощью лабораторного оборудования отслеживают маркеры, производят подсчет клеток крови. Знание количества каждой из них позволяет квалифицировать опухолевые заболевания, подтвердить диагноз пациенту с определением конкретного его типа, например: достоверно установить вид лимфомы, лейкоза. Такая точная диагностика позволяет сделать выбор наиболее эффективной схемы лечения.

Метод исследования, условия, необходимые для проведения

Иммунофенотипирование – это исследование лимфоцитов, которое помогает увидеть клетки крови, распознать их принадлежность к определенному виду. Исследование проводят с использованием современного диагностического оборудования – цитофлюориметров или особых микроскопов, способных опознавать люминесцирующие составляющие, которые помогают различать разновидности люминесцирующих кровяных телец, вести точный их подсчет в каждой пробе. Оборудование позволяет опознать каждую из меток. Маркирование клеток – это добавление в пробу антикоагулянта (реагент К2ЭДТА).

Забор образца для анализа производится из вены в области локтевого сустава. Для точного результата пациент должен соблюсти условия – проба берется натощак в утреннее время. В некоторых случаях допускается легкий прием пищи за 4 часа до процедуры, пациенту можно выпить небольшое количество обычной воды. Занятия спортом накануне диагностики или прием алкоголя запрещен, нарушение запрета приводит к искаженным результатам анализа. Повышенная психоэмоциональная нагрузка недопустима.

Для взятия крови специалист использует вакуумную пробирку. Ее применение позволяет достичь точного результата исследования, снизить болевые ощущения, точно произвести соотношение биологического материала и реагента.

После того, как образец поместили в пробирку, лаборант перемещает взятую пробу с антикоагулянтом, для этого требуется 10 раз медленно перевернуть емкость.

Для хранения и транспортировки материала для анализа требуется соблюдение условий: температурного режима при хранении образца от 18 до 23°С, сохранения положения пробирки – вертикально. Срок ожидания результатов не превышает 24 часов от взятия пробы. Время проведения исследования – 4 часа.

Сбор биоматериала для анализа

Количественный состав каких клеток отражает результат анализа?

В ходе проведения исследования специалисты клинической лаборатории отслеживают показатели в периферической крови пациента, возможные поражения. На бланк анализа заносят показатели:

  1. Абсолютное количество лимфоцитов, имеющих здоровое округлое ядро без патологий.
  2. Содержание Т-клеточных лимфоцитов – ядро этого вида кровяных телец образуется и созревает в тимусе или вилочковой железе. Обеспечивает иммунную реакцию организма в определенных условиях, осуществляет контроль над гуморальным ответом организма – работой В-лимфоцитов, которые образовывают антитела. Обозначают ядро Т-клеточного лимфоцита как CD3+.
  3. Количественное значение Т-хеплеров (ядро обозначается CD3+CD4+) – разновидности Т-лимфоцитов, оптимальное количество которых в крови способствуют усилению иммунного ответа организма на поражение чужеродным антигеном, их 2 типа. Т-клеточный хелпер первого типа является «защитником» от опухолевых новообразований, вирусных агентов, участвует в защитных воспалительных реакциях. Второй Т-клеточный тип обеспечивает взаимосвязь с гуморальным иммунитетом, участвует в выработке иммуноглобулина Е – веществе, воздействующим на агрессивные аллергены внешней среды, смягчает поражение ими.
  4. Количество Т-цитотоксических лимфоцитов, ядро которых принято обозначать как CD3+CD8+. Такие лимфоциты распознают поражение клеток собственного организма и проводят их лизис или растворение. Таким способом организм борется с опухолевыми тканями, с поражением бактериями, которые паразитируют на клеточном уровне. Ядро Т-цитотоксического лимфоцита – важный компонент иммунитета, направленного на уничтожение вирусов.
  5. В-лимфоциты, обозначаемые символами СD19+, вырабатывают активные вещества (антитела), действие которых направлено на поддержание гуморального иммунитета.
  6. Количество ЕК-клеток, их ядро обозначается как CD3-CD16+CD56+. Их называют естественными, или натуральными, киллерами. Такое название определяет их неиммунная цитологическая активность, которая направлена на клетки-мишени, имеющие неопластические изменения.
  7. Т-ЕК (ЕКТ) – клетки, ядро которых имеет естественную киллерную активность, защищают от поражения клеток, имеющих качества и признаки Т-лимфоцитов.
  8. Иммунорегуляторный индекс, который показывает соотношение Т-хелперов и Т-цитотоксических клеток в крови, обозначается в анализе в виде соотношения CD3+CD4+/CD3+CD8+.

Когда назначают исследование?

Фенотипирование видов лимфоцитов назначают для диагностики ряда заболеваний. Иммунологи назначают исследование, если имеются основания заподозрить одни из них или при наличии «ярких» признаков других. Например: расшифровка количества лимфоцитов с определенным фенотипом понадобится при:

  • инфекционных заболеваниях, поражении хронического характера или если болезнь имеет затяжной характер;
  • аллергических реакциях организма;
  • проявлении устойчивых признаков и симптомов, указывающих на иммунодефицит врожденного или приобретенного свойства;
  • подозрении на опухолевые образования доброкачественной или злокачественной природы;
  • заболеваниях аутоиммунного типа, спровоцированных расстройством защитной системы, поражением собственного организма;

Диагностика периферической крови требуется в других случаях. Ее назначат перед серьезным оперативным вмешательством, которое требуется больному в плановом порядке. При иммунофенотипировании врач узнает все процессы иммунного характера, происходящие у конкретного больного, что позволяет скорректировать защитные процессы, избежать клеточного поражения, и нормализовать их работу. Большое значение для врача имеют показатели различных видов кровяных телец, Т-клеточный состав крови в послеоперационный период, особенно в случаях с развитием патологических процессов.

Метод применяют и для оценки состояния человека, которому требуется трансплантация органов или проведена операция – анализ на иммунофенотипирование проведут на подготовительном этапе и во время послеоперационного восстановления, чтобы предупредить поражение и отторжение органа. Направление на анализ получают пациенты, лимфоциты которых могут изменить качественный и количественный состав из-за лечения заболеваний медикаментами определенных групп – иммуномодуляторами, иммунодепрессантами или цитостатиками.

Нормы и референсные значения содержания в крови частиц определенного вида зависят от возраста пациента. Врачи для оценки показателей используют специальные таблицы, в которых указаны оптимальные значения, пределы отклонений.

Какие проблемы отражают повышенные и пониженные Т-клеточные лимфоциты

Результат анализа покажет отклонение от нормы по количеству Т-клеточных лимфоцитов. Повышение их количества свидетельствует об иммунном воспалении, поражении или гиперактивности защитных процессов пациента. Такое превышение нормы вызывают заболевания – лимфолейкоз (острая и хроническая стадии), ряд вирусных и бактериальных инфекций в начале развития болезни. Увеличение Т-лимфоцитов возможно при изменении характера заболевания, переход его в хроническую форму.

Если у обследуемого абсолютное число Т-клеточных лимфоцитов снижено, говорят о развитии иммунологического паралича. Он сопровождает воспалительный процессы, может указывать на развитие злокачественных опухолевых новообразований. Такой показатель выявляется, если больная сердечная мышца – миокард, при некоторых сложных травмах, его снижение вызывает курение.

Колебание числа В-лимфоцитов

Увеличение числа В-лимфоцитов сигнализирует о поражении организма воспалительным процессом, развивающимся в острой или хронической стадии. Его природа – аллергического, аутоиммунного или инфекционного характера. Эти лимфоциты увеличиваются из-за В-лимфолейкоза, бронхиальной астмы, муковисцидоза, больной печени и при хронических патологиях. Увеличенные показатели по В-лимфоцитам в анализе отражают восстановление после инфекций, перенесенных в острой и тяжелой форме.

Если число В-лимфоцитов не соответствует нижним пределам нормы, при проведении дополнительной диагностики врач подтвердит пациенту развитие опухолевых новообразований, острые вирусные инфекции или инфекции бактериального типа, развитие очагов воспаления в организме больного.

Отклонения показателей естественных киллеров

Повышенному уровню естественных киллеров способствуют патологические процессы, связанные с:

  • запуском онкологических процессов;
  • тяжелым течением воспалительного процесса, воспалительные заболевания в хронической стадии;
  • с избыточной выработкой антигенов, борющихся с бактериальным или вирусным процессом.

Содержание в клетках крови естественных киллеров может быть снижено из-за повышения уровня в крови Т-лимфоцитов и связано с процессами, вызывающими такое повышение.

Показатели Т-цитотоксических лимфоцитов

Если значение показателя CD8+ – в превышающих норму цифрах, закономерно заподозрить опухолевое заболевание, вирусный процесс в активной стадии (при развитии вирусной, грибковой или внутриклеточной инфекции, заболеваний подобного типа).

Сниженные значения Т-цитотоксических лимфоцитов в результатах анализа предупреждают о процессах, развивающихся на фоне аутоиммунных болезней. Такой процесс подтверждает атаку аллергенов, развитие аллергии на момент обследования.

Как действует ядро зрелого Т-цитотоксического лимфоцита

Какие процессы определяются по уровню Т-хелперов

Повышение содержание Т-хеплеров свидетельствует об остром воспалительном процессе в активной стадии. Иммунное воспаление отражает увеличение Т-хеплеров первого типа, рост показателя по второму типу определяет наличие воспалительного процесса аллергической природы. Обострение аутоиммунной патологии определяется, если Т-хеплеры обоих типов увеличены.

Снижение Т-хелперов происходит из-за состояния иммунологического паралича, выявляет иммунодефицит вторичного типа у больного.

Отклонения значений по уровню Т-ЕК клеток

Количество Т-ЕК клеток повышается, увеличиваясь по отношению к референсным значениям их содержания в крови по причине:

  • наличия хронических воспалительных процессов с длительным периодом воздействия на иммунную систему;
  • воспалительных процессов, сопровождаемых тяжелым протеканием, осложнениями при лечении;
  • сохранение инфекции в активном состоянии в клетках организма на протяжении значительного периода времени.

Сниженные лимфоциты такого вида не отображают значимые процессы, не являются важными для диагностики.

Использование метода иммунофенотипирования лимфоцитов позволяет проводить диагностику патологий, заподозрить развитие опасных, опухолевых болезней. Метод является безопасным для обследуемого, не требует значительных финансовых затрат.

Иммунофенотипирование лимфоцитов

Метод исследования, условия, необходимые для проведения

При исследовании определяется принадлежность клеток крови к тому или иному виду. Для проведения анализа требуется использование специального оборудования — цитофлюориметра. Также могут применяться микроскопы, при помощи которых фиксируют люминесцирующие метки и проводят их точный подсчёт. Оборудование должно давать возможность опознать каждую специальную метку в исследуемом материале.

Забор крови производят в вакуумную пробирку.

Кровь в пробирке обязательно перемешивают, медленно переворачивая ёмкость 10 раз. Транспортируют в лабораторию материал при температуре от 18 до 23 градусов, вертикально установив пробирку. Максимальный срок хранения взятого материала сутки. Само исследование занимает менее 5 часов.

Количественный состав каких клеток отражает результат анализа?

При исследовании интерес представляют несколько видов клеток. В бланке исследования будут зафиксированы полученные данные.

  1. Здоровые полноценные лимфоциты. Фиксируется абсолютное количество лимфоцитов, которые не деформированы, имеют правильное круглое ядро. Патологические изменения в них отсутствуют.
  2. Лимфоциты Т-клеточные. Ядро клеток формируется в вилочковой железе и тимусе. Клетки контролируют работу В-лимфоцитов, образующих ряд антител.
  3. Количество Т-хелперов. Одна из разновидностей T-лимфоцитов. Они обеспечивают правильный иммунный ответ организма при обнаружении чужеродного антигена. Данные клетки первого типа предупреждают развитие раковых клеток, а второго — действуют на агрессивные аллергены.
  4. Лимфоциты Т-цитотоксические. Они отвечают за уничтожение собственных клеток организма, если они поражены. Это свойство помогает противостоять опухолевым процессам, тяжёлыми бактериальными заболеваниями, когда возбудитель паразитирует внутри клетки.
  5. В-лимфоциты. Отвечают за выработку веществ, которые отвечают за правильность работы гуморального иммунитета.
  6. ЕК-клетки. Это естественные киллеры, действие которых избирательное и направленное на клетки с неопластическими изменениями.
  7. ЕКТ. Также природные киллеры, которые уничтожают патологические клетки, замаскированные под Т-лимфоциты.
  8. Иммунорегуляторный индекс. Он отражает соотношение Т-цитотоксических клеток и Т-хелперов.

Показания к исследованию

Исследование проводится по ряду показаний. В общую программу диспансеризации данный анализ не входит. Показания для проведения исследования следующие:

  • инфекционные патологии, если они затяжные или хронические;
  • сильные аллергии;
  • наличие симптомов иммунодефицита различной природы;
  • подозрения на рост опухолевых новообразований раковой или доброкачественной природы;
  • заболевания аутоиммунного характера;
  • тяжёлые плановые операции;
  • подготовка к пересадке внутренних органов;
  • длительный приём лекарственных препаратов, которые могут повлиять на лимфоциты.

О чем говорят повышенные и пониженные Т-лимфоциты

Отклонения показателя от нормы в большую сторону указывает на развитие воспаления иммунной природы. Чаще всего явление связано с лимфолейкозом, некоторыми вирусными и бактериальными заболеваниями, а также переходом патологии в хроническую форму. Отклонение в меньшую сторону указывает на иммунологический паралич. Такое явление обычно сопровождает период активного развития раковых опухолей. Также возможно присутствие поражений сердца.

Колебание числа В-лимфоцитов

Повышенный показатель указывает на наличие воспалений в острой или хронической формах. Заболевание может быть вызвано аллергическими, инфекционными или аутоиммунными процессами. При падении уровня компонента крови речь может идти о вирусной инфекции, раковом новообразовании или очаговом воспалении бактериальной природы.

Отклонения показателей естественных киллеров

Изменение показателя выше нормы указывает на тяжёлую, запущенную онкологию, сильные хронические воспаления или чрезмерное синтезирование антигенов против вирусов и бактерий. Понижение показателя возникает из-за высокого уровня Т-лимфоцитов и связано с состояниями, вызывающими его.

Показатели Т-цитотоксических лимфоцитов

Повышение показателя указывает на развитие опухолевого процесса. Также возможно тяжёлое вирусное заболевание в активной форме. Понижение показателя связано с состояниями, развивающимися по причине аутоиммунных нарушений.

Какие процессы определяются по уровню Т-хелперов

Высокие показатели указывают на воспаление в острой форме. Особенно высокие показатели отмечаются при аутоиммунных воспалениях. Снижение показателя связано с вторичным иммунодефицитом и иммунологическим параличом.

Отклонения значений по уровню Т-ЕК клеток

Увеличение показателя возможно по причине хронического воспаления, активной инфекции, присутствующей в организме длительное время, и воспалительных осложнений. Падение значения не имеет диагностической ценности.


Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16,56

Литература

  • Рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением.
  • Подозрение на генетически обусловленный или приобретённый иммунодефицит.
  • Аутоиммунные заболевания.
  • Аллергические заболевания.
  • Онкологические заболевания.
  • Обследование реципиентов до и после трансплантации органов.
  • Обследование пациентов перед серьёзными оперативными вмешательствами.
  • Осложнённое течение послеоперационного периода.
  • Контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Возраст % от общего количества лимфоцитов
СD3 + (Т-лимфоциты)
1-3 мес. 55 – 78 2070 – 6540
3 мес. – 1 год 45 – 79 2280 – 6450
1 – 2 года 53 – 81 1460 – 5440
2 – 6 лет 62 – 80 1610 – 4230
6 – 16 лет 66 – 76 1400 – 2000
> 16 лет 60 – 89 880 – 2400
CD3+CD4+ (Т-хелперы)
1-3 мес. 41 – 64 1460 – 5116
3 мес. – 1 год 36 – 61 1690 – 4600
1 – 2 года 31 – 54 1020 – 3600
2 – 6 лет 35 – 51 900- 2860
6 – 16 лет 33 – 41 700 – 1100
> 16 лет 31 – 61 540 – 1460
CD3+CD8+ (Т-цитотоксические лимфоциты)
1-3 мес. 16 – 35 650 – 2450
3 мес. – 1 год 16 – 34 720 – 2490
1 – 2 года 16 – 38 570 – 2230
2 – 6 лет 22 – 38 630 – 1910
6 – 16 лет 27 – 35 600 – 900
> 16 лет 14 – 36 210 – 1200
CD19+ (В-лимфоциты)
1 мес.-2 года 19 – 31 500 – 1500
2 – 6 лет 21 – 28 700 – 1300
6 – 16 лет 12 – 22 300 – 500
> 16 лет 5 – 19 100 – 480
CD3-CD16+CD56+ (ЕК-клетки)
1 – 4 мес. 2 – 14 40 – 915
4 мес. – 1 год 2 – 13 40 – 915
1 – 2 года 3 – 16 40 – 915
2 – 6 лет 4 – 23 96 – 1330
6 – 12 лет 4 – 26 96 – 1330
12 – 16 лет 6 – 27 100 – 500
> 16 лет 4 – 26 78 – 470
CD3+CD16+CD56+ (ЕКТ-клетки)
1 мес.- 16 лет 0- 10
>16 лет 1-13
ИРИ (иммунорегуляторный индекс, соотношение CD3+CD4+ / CD3+CD8+
1-3 мес 1,30- 3,50
3-12 мес 1,20-3,50
1-2 года 1,00-3,00
2-6 лет 1,00-2,10
6-16 лет 1,10-1,40
>16 лет 1,00-3,50

Т-хелперы, Тh (CD4+)

Гипореактивность (иммунологический паралич). Снижение CD4+ лимфоцитов – основной лабораторный признак вторичного иммунодефицитного состояния.

Исследование крови на иммунофенотипирование

Исследование крови на иммунофенотипирование — один из наиболее точных методов диагностики. С помощью него обнаруживают и квалифицируют различные заболевания, подтверждают диагноз, также данный метод позволяет определить наиболее удачную схему лечения.

Все исследования проводятся высококвалифицированными сотрудниками ООО «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР» в Москве по приемлемой стоимости: профессором, доктором медицинских наук Луговской С. А., доцентом, кандидатом медицинских наук Почтарь М. Е., доцентом, кандидатом медицинских наук Наумовой Е. В.

Какой биоматерила используется для анализа ИФТ?

В зависимости от задач исследования, материалом для анализа может служить:

  • периферическая кровь (взятие анализа осуществляется в медицинском центре «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР»);
  • костный мозг (стернальная пункция выполняется врачом-гематологом стационара в пробирку с К2-ЭДТА);
  • ликвор (люмбальная пункция проводится врачом стационара, ликвор собирается в пробирку со стабилизатором Transfix);
  • выпотные жидкости (плевральная, асцитическая, перикардиальная — взятие материала проводится врачами стационаров).

Суть исследования заключается в том, что при его проведении определяются типы клеток крови. С помощью особого оборудования или люминесцентных микроскопов, легко распознать принадлежность каждой из этих клеток к тому или иному виду и выявить возможные поражения.

Как подготовиться к исследованию крови на иммунофенотипирование?

Забор биоматериала производится в утренние часы натощак. Перед проведением исследования, необходим период голодания, желательно, более 8 часов. Можно выпить небольшое количество воды. За несколько дней до процедуры недопустимо употребление алкоголя, курение сигарет, активные занятия спортом. На искажение результатов анализа ИФТ влияют тяжелые психоэмоциональные состояния.

Показания для проведения исследования

Как и любой анализ, иммунофенотипирование проводится по ряду причин. Основные из них:

  • Затяжной характер заболевания;
  • Острые воспалительные и вирусные поражения;
  • Подозрение на новообразования любого характера;
  • Анализ назначают перед проведением серьезных медицинских манипуляций;
  • Аллергические реакции;
  • При нарушении защитных функций организма;
  • Постоперационный период, сопровождающийся патологическими процессами;
  • Перед и после трансплантации внутренних органов;
  • Подозрение на наследственный или приобретенный иммунодефицит.

Обратите внимание, что интерпретировать результаты исследования крови на иммунофенотипирование нельзя самостоятельно и тем более, заниматься самолечением. Поставить точный диагноз может только врач-иммунолог, обращаясь также к другим результатам анализов и обследований. Нормы показателей отличаются в зависимости от пола и возраста пациента.

В нашем медицинском центре в Москве есть все необходимое для качественной диагностики — врачи с многолетним опытом, современное оборудование, дружелюбный сервис и разумная цена на услуги. С помощью анализа на ИФТ легко предотвратить страшную болезнь или обнаружить едва начавшиеся патологические процессы. Позаботьтесь о своем здоровье уже сегодня!

Иммунофенотипирование лимфоцитов – проведение анализа и расшифровка

  • О Центре
    • Дирекция
    • История
    • Все руководители Центра
      • Богданов А. А. (Малиновский)
      • Богомолец А. А.
      • Багдасаров (Багдасарян) А. А.
      • Киселёв А. Е.
      • Гаврилов О. К.
      • Федотенков А. Г.
      • Воробьёв А. И.
      • Савченко В. Г.
    • Наши награды
    • Выдающиеся гематологи и трансфузиологии, работавшие в Центре
    • Официальная информация
    • Печатные издания Центра
      • «Гематология и трансфузиология»
    • Нормативные документы
    • Политика конфиденциальности
    • Вакансии
  • Наука
    • Подразделения
    • Клинические апробации
    • Результаты научной деятельности
      • Темы НИР
      • Результаты НИР
      • Патенты и авторские свидетельства
      • Гранты и договоры
      • Информационно-аналитическая система результатов научной деятельности
    • Научные мероприятия, конференции, конгрессы
      • Конференции
      • Конгрессы
    • Диссертационные советы
      • Диссертационные советы на базе ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
      • Нормативные документы
      • Объявления о защите
      • Документы для защиты
    • Правила публикаций и электронные журналы
      • Правила для авторов публикаций
      • Электронные журналы
    • Аттестация научных работников
    • Конкурсы на замещение должностей научных сотрудников
  • Клиника
    • Подразделения
    • Практикующему врачу
      • Клинические рекомендации
      • Российский реестр лекарственных препаратов, применяемых у больных с нарушениями порфиринового обмена
        • О реестре
      • Порядки оказания медицинской помощи
      • Стандарты медицинской помощи
    • Пациенту
      • Правила записи на прием
      • Сведения о медицинских работниках
      • Порядок получения помощи пациентам с нарушениями свертывания крови
      • Высокотехнологичная медицинская помощь
      • Порядок получения талона-направления на высокотехнологичную медицинскую помощь
      • Правила и сроки госпитализации
      • Правила посещения пациентов стационара
      • Прайс. Платные медицинские услуги
      • Правила пересылки биоматериалов для лабораторных исследований
      • Расписание работы патологоанатомического отделения
      • Правила подготовки к диагностическим исследованиям
      • Пациентам «листа ожидания» почечного трансплантата
      • Часто задаваемые вопросы
      • Территориальная программа государственных гарантий бесплатного оказания гражданам медицинской помощи
      • Правила внутреннего распорядка для пациентов и посетителей
      • Страховые компании, с которыми работает Центр
      • Оценка качества оказания медицинских услуг
      • Гематологический глоссарий
  • Трансфузиология и донорство крови
    • Подразделения
    • Современная научно-практическая деятельность в трансфузиологии
    • Отзывы доноров и пациентов
    • Донору
      • Зачем сдавать кровь
      • Кто может стать донором
      • Противопоказания к донорству
      • Как стать донором
        • Процесс сдачи крови
        • Почетный донор России
        • Льготы для доноров
      • Виды донорства
        • Донорство цельной крови
        • Донорство плазмы
        • Донорство тромбоцитов
        • Донорство гемопоэтических стволовых клеток
      • Что должен знать донор?
        • Питание донора
        • Периодичность донации
        • Безопасность донации
        • Карантинизация плазмы
      • Справка о количестве кроводач, плазмодач
      • Адресное донорство
      • Использование донорской крови
      • Часто задаваемые вопросы
      • Словарь донора
      • Кодекс донора
      • Новости для доноров
      • Контакты
  • Телемедицина
  • Образование
    • Сведения об образовательной организации
    • Аспирантура
    • Ординатура
    • Приемная комиссия
      • Приемная комиссия 2016
      • Приемная комиссия 2017
      • Приемная комиссия 2018
      • Приемная комиссия 2020
      • Приемная комиссия 2020
    • Нормативные документы
    • Электронная информационно-образовательная среда
      • Информационно-библиотечные ресурсы
      • Образовательный портал аспирантуры и ординатуры
      • Портал инновационного дополнительного образования
      • Образовательные мероприятия
    • Дополнительное образование
      • Непрерывное медицинское образование
      • Дополнительное профессиональное образование
  • Научно-производственная деятельность
    • Подразделения
    • Научная деятельность по разработке лекарственных препаратов
    • Производимые лекарственные препараты
      • Информация по лекарственному препарату Агемфил A, фактор свертывания VIII
      • Информация по лекарственному препарату Агемфил B, фактор свертывания IX
  • Межрегиональное взаимодействие
  • Проекты документов для обсуждения
    • Проект
    • Обсуждение в ФГБУ НМИЦ гематологии
  • Новости
  • Отзывы
  • СМИ о нас

Галерея

Лаборатория иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга

Заведующий лабораторией — Гальцева Ирина Владимировна (на фото справа).

Лаборатория была организована 1 марта 2013 г.

Иммунофенотипирование клеток, осуществляемое с помощью проточной цитофлуориметрии, широко применяется в клинико-диагностических и научных исследованиях. Отличительной чертой данного анализа является возможность определения фенотипа единичных клеток. Метод основан на применении моноклональных антител к антигенам дифференцировки, сочетание которых позволяет выявлять разнообразные клеточные популяции. Совокупность антигенов на поверхности клетки называется иммунофенотипом. Проточная цитофлуориметрия за последние 20 лет стала неотъемлемым исследованием в диагностике различных гематологических заболеваний, в частности лимфом, лейкозов, плазмоклеточных неопластических заболеваний, пароксизмальной ночной гемоглобинурии (ПНГ) и др. На основании данных об иммунофенотипе и анализе большого количества клеток проточная цитофлуориметрия позволяет находить крайне редко встречающиеся клеточные субпопуляции.

Коллектив лаборатории. Гальцева Ирина Владимировна (сидит) — заведующий лабораторией. Стоят: Капранов Н. М., Давыдова Ю. О.

Сотрудники лаборатории являются высококвалифицированными специалистами в области проточной цитофлуориметрии, прошли обучение не только в клинических центрах России, но и в зарубежных университетах и имеют сертификаты по основам проточной цитометрии. Прошли обучение в международной школе цитометрии в г. Женева (Швейцария) и получили сертификат, подтверждающий адекватность анализа и разрешающий проводить исследование ПНГ-клона (Россия, Америка). Также получили практический опыт работы по диагностике и анализу острых лейкозов и лимфом в Гентском университете в Бельгии. Сотрудники лаборатории регулярно посещают международные конференции и обмениваются знаниями с зарубежными и российскими коллегами.

Лаборатория тесно сотрудничает с научно-клиническими подразделениями НМИЦ гематологии. Основным направлением работы лаборатории является стандартизация и применение метода проточной цитофлуориметрии для диагностики минимальной остаточной болезни (МОБ) при таких заболеваниях, как множественная миелома, острые лимфобластные и миелобластные лейкозы.

В лаборатории осуществляют подсчёт гемопоэтических CD34-позитивных стволовых клеток на рутинной основе в образцах периферической крови, костного мозга и продуктах лейкоцитафереза согласно международному протоколу ISHAGE (International Society of Hematotherapy and Graft Engineering).

Врач КЛД Давыдова Юлия Олеговна.

Диагностика плазмоклеточных неоплазий и поиск МОБ при множественной миеломе проводится согласно последним мировым рекомендациям по стандартизации исследований, опубликованным в 2016 году (Stetler—Stevenson, Paiva, Rawstron). Мониторинг МОБ при острых В- и Т-линейных лимфобластных лейкозах проводится в рамках протоколов ОЛЛ-2009 и ОЛЛ-2016. Проводится оптимизация и отработка методики поиска МОБ при острых миелобластных лейкозах. Впервые в России в лаборатории начато применение и интеграция иммунофенотипического исследования в схему диагностики миелодиспластических синдромов. Данный анализ проводится в соответствии с европейскими рекомендациями сообщества LeukemiaNet.

Медицинский физик Капранов Николай Михайлович.

В лаборатории проводятся многочисленные исследования, которые ложатся в основу диссертационных работ врачей-гематологов и трансфузиологов. С участием сотрудников лаборатории опубликовано большое количество печатных работ и стендовые доклады на международных симпозиумах. В сферу научных интересов входят исследования субпопуляционого состава крови и костного мозга у больных после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, в частности Т-регуляторных клеток; изучение циркулирующих эндотелиальных клеток у больных после трансплантации; исследование экспрессии ангиотензин-превращающего фермента на мобилизованных стволовых клетках крови; изучение динамики ПНГ-клона у больных апластической анемией; проводится изучение элементов иммунологического синапса при лимфомах; фиксированных антитромбоцитарных антител у больных с множественными трансфузиями. На базе лаборатории проведено исследование активационных маркеров тромбоцитов в заготовленных при различных условиях тромбоконцентратах доноров, оценивается динамика изменения количества циркулирующих CD34+ клеток в периферической крови у пациентов после проведения спленэктомии, оцениваются различные свойства мультипотентных мезенхимных стромальных клеток, использующихся для профилактики реакции трансплантат против хозяина после трансплантации аллогенных стволовых клеток, оценивается динамика изменения субпопуляционного состава лимфоцитов крови у больных острыми В-лимфобластными лейкозами, получающих таргетную терапию и пациентов после выполнения трансплантации аллогенной почки.

Ключевые сотрудники

Давыдова Юлия Олеговна — врач клинической лабораторной диагностики.

Капранов Николай Михайлович — медицинский физик.

Иммунофенотипирование лимфоцитов – проведение анализа и расшифровка

Усилиями отечественных и зарубежных авторов достигнуты большие успехи в изучении онкогенетики В-ХЛЛ, согласно которым характер клинического течения заболевания, эффективность использования методов комплексной полихимиотерапии и прогнозирования патологии определяется, в частности, особенностями мутаций, затрагивающими те или иные структурные компоненты генома малигнизированных клеток [1; 4; 7; 8]. Несмотря на вышеуказанное, принципы генетической детерминации В-ХЛЛ в динамике развития патологии до сих пор остаются в значительной мере невыясненными, что затрудняет использование показателей экспрессии CD-маркерных молекул в качестве диагностических и прогностических критериев заболевания.

Целью настоящего исследования явился мониторинг экспрессии маркерных молекул на лимфоцитах крови при В-ХЛЛ и установление их взаимосвязи с динамикой сдвигов клеточного состава периферической крови. Систематизация существующих представлений в комплексе с полученными нами результатами исследований характера экспрессии маркерных молекул на клетках лимфоидной ткани позволит расширить традиционные принципы и методы классификации стадийности указанной патологии, а также оценки эффективности комплексной терапии заболевания и прогнозирования его течения.

Материал и методы исследования

Для решения поставленной задачи проведено комплексное клинико-лабораторное обследование 60 больных с В-ХЛЛ на различных стадиях развития патологии, находящихся на обследовании и стационарном лечении в клинике профпатологии и гематологии г. Саратова в период с 2007 по 2015 год. Больные рандомизированы в 4 группы наблюдения в соответствии со стадией заболевания по классификации Rai K.R., 1975 [1; 4; 7].

Верификация диагноза осуществлялась с использованием традиционных методов диагностики: изучения анамнестических данных, мониторинга показателей периферической крови (с помощью гематологического автоматического анализатора Micros-60 (ABX, Франция)), компьютерной томографии, рентгенологического и ультразвукового исследования, изучения миелограммы. Исследование характера экспрессии маркерных молекул (CD19, CD5, CD20, CD23, CD38) на лимфоцитах периферической крови проводилось на проточном цитометре Facs-Calibur (BD, США, 2006) с использованием стандартной панели моноклональных антител для типирования ХЛЛ.

Математическая обработка данных выполнена с применением современных статистических прикладных программ Microsoft Office: пакеты Excel и Microsoft Graf, Statistica 6.0 (Stat Soft Inc.). Данные в тексте представлены в виде медиан с указанием интерквартильного диапазона (2575-й процентили). Для межгруппового сравнения использовали непараметрический U-критерий Манна-Уитни, точный Z-критерий Фишера и показатель достоверности р; оценка различий проводилась по общепринятому порогу значимости (p

Ссылка на основную публикацию
Значение отклонений некоторых иммунологических показателей
Показатель Повышение показателя Снижение показателя
Т-лимфоциты (CD3+) Иммунное воспаление. Ответ по Тh 1 типу. Ответ по Тh 2 типу. Гипореактивность (иммунологический паралич).
Активный (острый) воспалительный процесс. При иммунном воспалении: ответ по Тh 1 типу – при инфекционных (вирусных, бактериальных) заболеваниях; по Тh 2 типу – при аллергическом воспалении; при аутоиммунном воспалении – ответ по Тh 1 или 2 типу (при генерализации аутоиммунного процесса).